1985年，周海媚进入无线第一期艺员训练班；同年参与拍摄第一部戏电视剧《杨家将》，饰演杨九妹；

1986年，参演吴启华主演的全年收视冠军电视剧《流氓大亨》。

1989年，主演创下了香港及东南亚地区的高收视电视剧《义不容情》。

1990年，参演无线台庆剧《笑傲在明天》。

1991年，和黎明、温兆伦主演电视剧《今生无悔》；同年出演台庆剧集《怒剑啸狂沙》，

1990年至1993年连续三年被评为“香港地区最受欢迎女演员”。

1992年，徐克筹拍电影《笑傲江湖Ⅱ东方不败》，想请周海媚参演，因出车祸而失之交臂；同年台湾的台视为庆祝台庆，出动金牌制作人杨佩佩拍摄剧集《末代皇孙》，邀请周海媚、黄日华主演，

1993年创下台湾历史收视记录。

1993年，周海媚在电影《逃学威龙之龙过鸡年》中首次饰演反派。

1994年，参演台湾制作人杨佩佩的电视剧《倚天屠龙记》，饰演周芷若一角。

1996年，周海媚重回TVB，参演剧集《大闹广昌隆》饰演“小芙蓉”，创下无线历史收视记录，周海媚获得最佳女主角提名，并与林家栋夺得TVB万千星辉颁奖典礼最佳萤幕情侣奖。

1997年，周海媚和日本影星永赖正敏合拍手机广告，并签约日本经纪人，在日本推出内衣写真集。

1998年，与黄日华合作主演电视剧《天地豪情》。同年，周海媚离开TVB，转签亚洲电视台，接拍4部港产电影和1部日本电影，成为玉宝表首位亚洲区代言人；参演王晶电视剧《纵横四海》饰演女一号路云，因中途患上红斑狼疮症，被迫“早死”停工闭关休养。

2000年复出，拍摄亚洲电视台的电视剧《影城大亨》。之后，因受身体的影响事业进入平淡期。

2005年，拍摄了《把酒问青天》 及《八阵图》。

2007年，参演胡歌版《射雕英雄传》饰演包惜弱，电视于2008年7月内地播出；12月获TVB邀请出席《万千星辉颁奖典礼》，担任“最佳男主角”颁奖嘉宾。

2008年1月远赴摩洛哥，踏足撒哈啦沙漠，为《向世界出发》第三辑担任首集嘉宾；同年重返TVB，与刘松仁合作《蔡锷与小凤仙》，饰演小凤仙。

2009年，参演《学警狙击》，在剧中与苗侨伟及谢天华发展三角恋。

2011年，与吴秀波、李光洁合作电视剧《醉酒当歌》饰演“女老板”；7月，参演的建党90周年红色献礼剧《大潮如歌》播出，周海媚饰演商界女强人“程美珊”。

2013年9月，参演TVB电视剧《神枪狙击》；11月，参演敦煌题材的穿越电影《敦煌传奇》，饰演“周皇后” 。